隨著化妝品市場的蓬勃發(fā)展，我國已成為世界上第二大化妝品消費(fèi)市場，近年來，為提高交易量，很多不法商販在配方中加入激素類藥物，從而在短時間內(nèi)達(dá)到皮膚滑嫩，增加皮膚彈性以及祛痘除皺的效果，然而長期使用該產(chǎn)品會導(dǎo)致皮膚產(chǎn)生黑斑、萎縮變薄，甚至還可能產(chǎn)生激素依賴性皮炎，我國《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）中明確規(guī)定抗感染類藥物、抗雄性激素物質(zhì)、糖皮質(zhì)激素類、雌激素類、孕激素類、具有雄性激素效應(yīng)的物質(zhì)為化妝品組分中的禁用物質(zhì)，對國家藥監(jiān)局網(wǎng)站五年內(nèi)發(fā)布的不合格化妝品中非法添加情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示非法添加的激素類藥物多種多樣，含量范圍廣，為確保化妝品安全使用、保障使用者的身體健康，對化妝品中激素類物質(zhì)的檢測具有重要意義。

      本文使用譜育科技的超高效液相色譜—三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀建立了檢測化妝品中的63種激素類藥物的方法，該方法檢測速度快且靈敏度高，可用于進(jìn)行化妝品中激素類藥物檢測。

實(shí)驗(yàn)部分

試樣、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑和設(shè)備

      試樣：某品牌護(hù)手霜。

      標(biāo)準(zhǔn)品：63種激素類藥物混合標(biāo)準(zhǔn)品購自阿爾塔，于-20℃冰箱保存。

      試劑：乙腈為色譜級。

儀器：ULC 510超高效液相色譜儀（具體配有二元超高壓輸液泵、超高壓自動進(jìn)樣器、柱溫箱）、EXPEC 5210三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀。

液相和質(zhì)譜條件

樣品前處理

      稱取樣品0.2 g（精確到0.001g），置于10 mL具塞比色管中，加入少量乙腈，在渦旋混合儀上振蕩30s至試樣與提取溶劑混合均勻，然后加入乙腈至近刻度，超聲提取20 min，靜置至室溫，用乙腈定容至刻度，搖勻，以4000 r/min離心10 min，濾過（必要時取上清液適量用50%乙腈溶液稀釋，稀釋液經(jīng)0.22 μm濾膜過濾），濾液作為待測溶液。

線性

      使用空白基質(zhì)稀釋激素類藥物混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，配制濃度為0.5 μg/L、1 μg/L、2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述方法進(jìn)樣，以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，采用外標(biāo)法擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，空白基質(zhì)色譜圖如圖1所示，0.5 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖2所示，各化合物線性相關(guān)系數(shù)r均大于0.995，線性良好。

圖1 空白基質(zhì)色譜圖

圖2 0.5 μg/L的激素類藥物標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

檢測限和定量限

      配置濃度為0.5 μg/L濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，按照S/N=10和S/N=3計(jì)算定量限和檢出限，結(jié)果如表2所示，各化合物檢測限在0.0002 μg/g ~0.0036μg/g，定量限在0.0006 μg/g ~0.0119 μg/g。

回收率

      2 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在75.25%~97.97%，20 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在80.16%~104.14%，50 μg/L濃度下，各激素類藥物的回收率在90.40%~112.26%。

樣品分析

      分別取三份樣品進(jìn)行樣品前處理，按以上方法測定，平行進(jìn)樣3次，樣品中激素類藥物色譜圖如圖4所示，激素類藥物含量如下表所示，結(jié)果表明，樣品中沒有63種激素類藥物存在。

圖4 樣品中63種激素色譜圖

結(jié)語

      本文建立了一種使用EXPEC 5210三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀測定化妝品中激素類藥物的方法。63種激素類藥物在0.5 μg/L ~100 μg/L濃度范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)大于0.995，線性良好；對濃度為1μg/L、10μg/L、100g/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液連續(xù)測定6次，各種激素類藥物的保留時間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.02%~0.17%，峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.65%~6.21%,計(jì)算濃度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.66%~4.99%，精密度良好；經(jīng)檢測和計(jì)算，使用該方法，各種激素類藥物的檢測限在0.004 ~0.02μg/g，定量限在0.006~0.012 μg/g；激素類藥物在2 μg/L、20 μg/L、50 μg/L濃度水平的回收率在75.25%~112.26%之間。使用該方法進(jìn)行實(shí)際樣品測試，表明應(yīng)試品牌護(hù)手霜中不含63種激素。以上結(jié)果表明，該方法靈敏度較高，可以快速、準(zhǔn)確地檢測化妝品中63種激素的含量。

l 附錄

設(shè)備與耗材方案

一、EXPEC 5210 ESI離子源配置詳情